Biofilm microbian. Concepte de bază

Articolul prezintă date din literatura despre biofilm - o formă specială de organizare a microflorei corpului uman, rolul biofilmelor microbiene în apariția și dezvoltarea multor boli comune, cauzele rezistenței la antibiotice în tratamentul lor.

Ce este biofilmul?

Corpul corpului corpului corpului uman a fost publicat.

Până la sfârșitul secolului trecut, microbiologia sa dezvoltat în principal pe baza studiilor culturilor pure de microorganisme. La sfârșitul secolului al XX-lea sa format o idee despre forma specială de organizare a microflorei corpului uman - o comunitate interactivă bine organizată de microorganisme acoperind suprafețele peretelui intestinal, alte mucoase, pielea și dinții unei persoane. Astăzi se știe că majoritatea bacteriilor există în natură, nu sub formă de celule plutitoare libere, ci sub formă de biofilme organizate în mod specific (Biofilms). În plus, bacteriile în sine constituie doar 5-35% din masa biofilmului, restul fiind matricea inter-bacteriană. Această formă de existență conferă bacteriilor o mulțime de avantaje în ceea ce privește expunerea la factorii de mediu adversi și la organismul gazdă. Microflora biofilmului este mai rezistentă la efectele factorilor adversi de natură fizică, chimică și biologică în comparație cu bacteriile de înot liber - au fost foarte rezistente la efectele radiației ultraviolete, deshidratare și viruși, antibiotice și factori de protecție imună [1, 3]. Factorul de rezistență la biofilm este stratul muco-polimeric produs imediat după aderare și include lipopolizaharide, proteoglicani, glicoproteine, endopolizaharide, similare substanței peretelui celular, glicocaliu și capsule bacteriene. Un exemplu al funcției protectoare a unui film polimeric este supraviețuirea Salmonella în timpul clorinării, ceea ce demonstrează stabilitatea biofilmelor la această metodă de dezinfecție.

În natură, biofilmele sunt omniprezente. Formarea biofilmelor este observată în majoritatea bacteriilor din mediile naturale, clinice și industriale. Ele se formează în condițiile fluidității la limita a două faze de mediu (lichid - lichid, aer lichid etc.). Biofilmele se găsesc pe substraturi solide imersate într-o soluție apoasă și pot crea și covorașe plutitoare pe suprafețe lichide. Un exemplu clasic de biofilm este stratul subțire pe stânci situate în mijlocul cursului. Cu resurse suficiente pentru creșterea biofilmelor cresc rapid la dimensiunea macroscopică. Biofilmele pot conține multe tipuri diferite de microorganisme, de exemplu, bacterii, protozoare, fungi și alge, fiecare din grupul care efectuează funcții metabolice specializate [2, 4, 5]. Watnick P. și Kolter R. numesc pe bună dreptate orașele microbiene ale biofilmului [1].

Biotehnologia modernă poate utiliza cu succes comunitatea microbiană optimă pentru a îndeplini anumite funcții. Acest lucru este relevant pentru producția de alimente, medicamente și aditivi alimentari, reciclarea diferitelor tipuri de deșeuri, neutralizarea apei și contaminarea solului cu produse petroliere. Astfel de comunități sunt uneori numite consorții de microorganisme. Practica a arătat o creștere variată a eficienței microorganismelor într-o astfel de organizație.

Biofilmul - o comunitate de microbi care sunt atașate la suprafață sau una la alta, închise într-o matrice de substanțe polimerice extracelulare sintetizate de ele, au un fenotip modificat, manifestat prin alți parametri ai creșterii și exprimării genelor specifice [6]. Această definiție ne permite să distingem comunitățile microbiene de biofilme de structuri similare numai din exterior, de exemplu, colonii de bacterii care se dezvoltă pe suprafața unui agar care nu prezintă niciuna dintre caracteristicile caracteristice unui biofilm adevărat. Este important de observat că bacteriile incluse în matricea fragmentelor care se detașează de biofilmele pe un dispozitiv medical colonizat și care circulă în fluidele corporale prezintă în mod constant toate caracteristicile fenotipice ale biofilmului inițial.

Există cinci etape de dezvoltare a biofilmului (figura 1):

1. În primul rând, apare atașarea primară a microorganismelor la suprafață (aderență, sorbție) din mediul înconjurător (de obicei, lichid). Această etapă este reversibilă.

2. Atașamentul final (ireversibil), altfel numit fixare. În această etapă, microbii secretă polimeri extracelulare care asigură o adeziune puternică.

3. Maturarea (în literatura engleză - maturizarea-I). Celulele atașate la suprafață facilitează atașarea celulelor ulterioare, matricea extracelulară cuprinde întreaga colonie. Nutrienții se acumulează, celulele încep să se împartă.

4. Creștere (în literatura de limbă engleză - maturizare-II). Se formează un biofilm matur, iar acum își schimbă dimensiunea și forma. Mazărea extracelulară servește la protejarea celulelor împotriva amenințărilor externe.

5. Dispersia (eliberarea bacteriilor): ca urmare a divizării, celulele individuale sunt periodic detașate de biofilm, care după un timp se pot atașa la suprafață și formează o nouă colonie.

Figura 1. Etapele dezvoltării biofilmelor (copie de pe Wikipedia)

Principalele proprietati ale biofilmului:
- comunitatea interactivă a diferitelor tipuri de microorganisme;
- microorganismele sunt colectate în microcolonii;
- microcoloniile sunt înconjurate de o matrice protectoare;
- microcolonii interioare - medii diferite;
- microorganismele au un sistem primitiv de comunicare;
- microorganismele din biofilm sunt rezistente la antibiotice, agenți antimicrobieni și reacția gazdei.

Până în prezent, rolul biofilmelor microbiene în apariția și dezvoltarea unor astfel de boli comune cum ar fi infecțiile asociate cu cateterizarea vaselor de sânge cauzate de Staphylococcus aureus și alte microorganisme gram-pozitive a fost dovedit în mod fiabil; infecții ale valvei cardiace și ale protezelor articulare cauzate de stafilococi; parodontita cauzată de un număr de microorganisme orale; infecții ale tractului urinar, determinate de E. coli și alți agenți patogeni; infecții ale urechii medii - cauza, de exemplu, Haemophilus influenzae, fibroza chistică cauzată de P. aeruginosa și altele.

Toate aceste boli sunt dificil de tratat, au o rată ridicată de recurență, iar unele dintre ele pot provoca rezultate letale. Mecanismele prin care microorganismele care formează biofilme provoacă procese patologice într-un macroorganism sunt departe de a fi clare.

În plus față de țesuturile gazdei, biofilmele microbiene colonizează diferite dispozitive medicale nebiologice introduse în corpul uman (catetere, stimulatoare cardiace, supape de inimă, dispozitive ortopedice). Studiile efectuate asupra dispozitivelor medicale implantate utilizând microscopia electronică au evidențiat prezența biofilmelor bacteriene.

Este important să se ia în considerare când se suspectează formarea de biofilmi la un pacient:

1. detașarea biofilmelor în fluxul sanguin sau în tractul urinar poate duce la formarea de emboli;

2. bacteriile din biofilme pot schimba plasmide de rezistență (transfer de rezistență de la specii la specii);

3. Biofilmele pot reduce sensibilitatea bacteriilor la agenții antimicrobieni.

4. biofilme cu gr. NEG. bacteriile pot produce endotoxine, care pot duce la șocuri toxice infecțioase;

5. Bacteriile din biofilm sunt imune la sistemul imunitar al gazdei.

Numeroase procese fiziologice care apar în biofilm diferă de fiziologia culturilor pure ale acelorași bacterii. În consecință, reacția microorganismelor la modificările condițiilor de mediu într-un biofilm este semnificativ diferită de reacția fiecărei specii într-o monocultură. O astfel de organizație asigură stabilitatea sa fiziologică și funcțională și reprezintă baza pentru supraviețuirea competitivă într-o nișă ecologică. Comunitatea de microorganisme organizează un singur sistem genetic sub formă de plasmide - ADN circular, care poartă codul comportamental pentru membrii biofilmului, definindu-și hrana (trofică), energia și alte relații între ele și lumea exterioară [2]. Acesta din urmă a primit o definiție specială ca fiind comportamentul social al microorganismelor - Qvorum sensis [1, 5].

Fenomenul comportamentului colectiv al bacteriilor a fost descris pentru aproximativ 20 de ani în urmă, totuși, funcțiile și rolul sistemului Qvorum sensis, care asigură comportamentul social al bacteriilor, este încă puțin înțeleasă și este subiectul cercetării științifice extrem de promițătoare pentru practica medicală. La om, avantajul unei astfel de organizații este de a asigura homeostazia organelor, a căror funcționalitate depinde de microbii care le locuiesc.

Conform opiniilor actuale, baza microflorei normale umane constituie obligã bacterii anaerobe, al căror număr ajunge la 14, 13 octombrie -10, care este de 1-2 ordine de mărime mai mare decât numărul de celule eucariote ale tuturor țesuturilor și organelor împreună [3, 21]. Studiile recente au arătat că reprezentanții microflorei normale sunt prezenți în organismul uman sub formă de microcoloniile fixate la anumiți receptori, incluși într-un biofilm, care, ca o mănușă, acoperă pielea și membranele mucoase. Biofilmul constă din exopolizaharide de origine microbiană, microcolonii și mucin [2]. Funcțional, biofilmul seamănă cu placenta. Dacă placenta reglează relația dintre făt și corpul mamei, atunci biofilmul joacă un rol similar prin reglarea relației dintre macroorganism și mediu. În plus, microorganismele care fac parte din biofilme realizează numeroase reacții metabolice, implicându-se în procesele de sinteză și degradare a ambilor compuși formați în organismul gazdă și substanțe străine, participă la procesele de recunoaștere, absorbție și translocare a agenților utili și potențial nocivi. [2, 3, 5]. În același timp, ca și în orice microbiocenoză, în biofilmele se găsesc în mod constant tipuri de bacterii (microflora indigenă) și tipuri tranzitorii de microbi. Compoziția conținutului intestinal include reprezentanți ai 17 de familii, 45 genuri si peste 400 de specii de microorganisme, ele formează un complex privind organizarea unui biofilm, fapt care ne face, de exemplu, un nou mod de a privi mecanismul de originea și cauzele dysbiosis intestinale, și modul în care aceasta tratament. Din acest punct de vedere, dysbacterioza nu poate fi considerată fluctuație a conținutului relativ al anumitor tipuri de microorganisme. Bowel dysbacteriosis reprezintă o tulburare structură biofilm radicală mucoasa colonică și imunitatea colectivă biofilm patologică adesea negates substanțial posibilitatea corecției disbacterioză folosind probiotice (preparate culturi vii intestinale principale microorganisme: bifidobacterii, lactobacili și alte enterobacterii). Astfel, pentru medicina practică, avantajul unui răspuns colectiv are o parte negativă. Bacteriile din biofilmele au o rată crescută de supraviețuire în prezența substanțelor agresive, a factorilor de protecție imună și a antibioticelor. Bacteriile și ciupercile din biofilme supraviețuiesc în prezența antibioticelor, în special, biofilmele au fost capabile să reziste concentrațiilor de antibiotice de 100-1000 de ori mai mari decât dozele terapeutice care suprimă celulele bacteriene unice [10]. Deoarece celulele bacteriene libere sunt mai puțin protejate decât biofilmele, un antibiotic care este foarte activ in vitro atunci când este testat în cultura pură, atunci când este testat in vivo (când prevalează fenotipul biofilmului) poate fi ineficient. În această privință, una dintre principalele probleme ale medicinei practice este problema tratamentului bolilor de origine microbiană, în cazurile în care sensibilitatea la antibiotice a microorganismelor asociate cu un biofilm nu corespunde cu cea determinată în testele de laborator pe izolate clinice de culturi pure de bacterii. În acest sens, în ultimii ani, a fost studiat în mod activ un studiu activ al acțiunii antibioticelor asupra biofilmului bacteriilor care provoacă procese patologice de diferite localizări.

Se consideră dovedit că biofilmul crește virulența și patogenitatea tuturor agenților patogeni. Se estimează că frecvența infecțiilor cu biofilm, în special în țările dezvoltate, este de 65% -80% [17]. Mulți agenți patogeni, cum ar fi E. coli, Salmonella, Yersinia enterocolitica, Listeria, Campylobacter, există sub forma unui biofilm pe suprafața alimentelor sau pe suprafața echipamentului pentru depozitarea lor. În plus, bacteriile patogene, cum ar fi Staphylococcus aureus, Enterococcus, Streptococcus, E. coli, Klebsiella, Pseudomonas, cresc de obicei pe catetere, articulații artificiale, supape mecanice etc. [17,18,19]. Activitatea biofilmică a fost înregistrată în timpul infecțiilor, cum ar fi caria dentară, fibroza chistică, infecțiile tractului urinar, endocardita, otita medie, infecțiile oculare și ranile. Capacitatea lui H. pylori de a forma un biofilm pe membrana mucoasă a stomacului și, prin urmare, terapia optimă împotriva helicobacterului este demonstrată prin eradicarea biofilmului H. pylori [9, 17, 21, 25]. Creșterea rezistenței la antibiotice și dezvoltarea biofilmelor bacteriene reprezintă probleme majore în tratamentul infecțiilor tractului urinar.

În prezent, există un studiu intensiv al motivelor pentru o rezistență uimitoare la antibiotice în bacteriile biofilmice. Se stabilește că baza supraviețuirii crescute sunt proprietățile celulelor și ale matricei extracelulare. Matricea biofilmică poate să se lege sau să nu-și piardă și / sau să inactiveze antibioticele [3, 11, 13]. Stabilitatea cauzată de proprietățile celulelor biofilmice este atribuită unei scăderi a suprafeței lor libere datorită contactelor între ele și formării de bacterii speciale, numite persiste. Persistenții din cauza diferențierii devin temporar rezistenți la aproape toate medicamentele antibacteriene [6, 15, 16]. Principalele mecanisme pentru creșterea rezistenței bacteriilor la antibiotice în biofilme sunt: ​​1. limitarea penetrării antibioticelor prin biofilme; 2. restricționarea alimentelor și micromediul modificat într-un biofilm conduc la o scădere a ratei de divizare a bacteriilor, ca rezultat al cărora rămân mai puține ținte pentru antibiotice;
3. răspunsuri adaptive; 4. variabilitatea genelor în bacteriile persistente în biofilm.

Pe baza datelor acumulate, rezultă că antibioticele pentru acțiunea biofilmelor asupra bacteriilor sunt împărțite în două tipuri. Primul include antibiotice care pătrund în biofilme și inhibă sau ucid microorganismele care le formează. Al doilea tip este antibioticele, care practic nu penetrează în biofilme, dar împiedică în mod eficient dispersarea acestora datorită bacteriilor migratoare [2, 11, 16]. Astfel, unele antibiotice nu pătrund în biofilme și nu distrug comunitățile existente, ci doar le împiedică să crească în număr și să se răspândească în corpul uman. În acest sens, în ultimii ani, a început studiul capacității antibioticelor de a penetra în biofilmul microbilor diferiți. Sa constatat că Klebsiella pneumoniae biofilmelor penetrează slab ampicilină și comunitatea Enterococcus faecalis - ampicilina, co-trimaksozol și vancomicină [8, 14, 15]. Amoxicilina utilizată pe scară largă nu pătrunde bine în biofilmele unui număr mic de microbi [16].
Printre antibioticele care penetrează bine prin lipidele celulare se numără fluoroquinolonele. Acest grup de medicamente antimicrobiene este capabil să acționeze asupra principalilor agenți patogeni ai bolilor urologice, în concentrație suficientă penetrează în sursa de infecție [9]. Experiența cu utilizarea antibioticelor indică faptul că procesul infecțios, în special manifestările sale clinice, poate fi gestionat cu ajutorul antibioticelor, atât penetrante, cât și nepătrunse în biofilme. Cu toate acestea, diferența dintre ele există și este destul de semnificativă. Se demonstrează că diferențele dintre antibiotice care penetrează și nu penetrează în biofilme se pot manifesta prin rezultatele pe termen lung ale tratamentului. Utilizarea antibioticilor care penetrează prost în biofilm, conduce rapid la formarea și selecția tulpinilor rezistente. În plus, cu aceasta mai des întâlnirile apar și

focarele proceselor cronice.

Astfel, este clar că creșterea eficacității tratamentului este imposibilă fără a testa antibioticele pentru capacitatea de a penetra în biofilme, a acționa asupra comunităților deja formate și a inhiba formarea și reinstalarea lor. Abilitatea de a pătrunde în biofilme și de a acționa asupra bacteriilor situate în interiorul și răspândirea este o proprietate foarte importantă a antibioticelor, din păcate, nu sunt suficient studiate și puțin cunoscute practicieni. Posibilitatea unor medicamente, cum ar fi claritromicina, inhibă formarea glycocalyx și capacitatea acestuia în combinație cu o cefalosporină de generația I sau vancomicină inhiba formarea de biofilme pe echipament medical titan: schimbă structura biofilmului, cantitatea de alginat este redusă, hexozele glycocalyx diluant crescut astfel penetrarea agentului antimicrobian.

Sunt în curs de aprofundare studii pentru studierea mecanismelor de formare a biofilmelor. Dr. Stanley-Wall a investigat genele și proteinele necesare pentru formarea biofilmului Bacillus subtilis. Ea a arătat, în special, că posibilitatea de formare a biofilmului determină o proteină numită DegU [25]. Sa demonstrat că proteina SasG situată pe suprafața Staphylococcus aureus, împreună cu ionii de zinc, este necesară pentru construirea biofilmului [27]. Proteina de legare a ARN CsrA Escherichia coliK-12 poate fi, în funcție de condițiile de cultivare, ca stimulant și disruptor de biofilm prin afectarea biosintezei intracelulare a glicogenului. Proteina CsgD E.Coli activează creșterea fimbriilor și sinteza polizaharidelor extracelulare, contribuind la formarea biofilmelor [28].

Cercetătorii de la Institutul Pasteur din 2010 au arătat pentru prima dată că unii viruși, în special retrovirusul HTLV-1, sunt capabili să formeze complexe similare biofilmelor bacteriene. Datorită virușilor cu biofilm sunt protejați de sistemul imunitar, ceea ce le permite să se răspândească de la celulă la celulă. Studiul formării biofilmelor virale poate determina o nouă strategie terapeutică care să se concentreze nu numai asupra virusului, ci asupra biofilmului viral [26].

Ideile despre biofilme, confirmate prin metode moderne de imagistică, au schimbat punctele de vedere asupra bolilor infecțioase. Toate datele noi sugerează că infecțiile cronice sunt fundamental diferite de formarea biofilmului acut, iar fagocitele microorganismului nu pot absorbi biofilmele, spre deosebire de celulele bacteriene individuale [22]. Existența biofilmelor în infecțiile cronice necesită abordări complet noi pentru diagnosticarea și tratamentul lor. Diversitatea genetică și fenotipică inerentă biofilmelor sporește rezistența lor la factorii nocivi, ceea ce le permite să tolereze majoritatea efectelor terapeutice [23]. În plus, metodele bacteriologice tradiționale nu dezvăluie majoritatea bacteriilor implicate în procesul infecțios [24]. Cele mai noi metode moleculare, genomice, transcripționale și proteomice au făcut posibilă determinarea faptului că numai aproximativ 1% din celulele patogene de microbiocenoză sunt determinate atunci când se izolează o cultură pură. Ca rezultat, tratamentul vizează numai 1-2 specii de bacterii dintr-o varietate de tulpini prezente în compoziția biofilmului (inclusiv, eventual, fungi) [23, 24]. Acum nu există nicio îndoială că este necesară revizuirea conceptului de patogeneză a diferitelor infecții cronice, încorporând datele disponibile privind biofilmele, care necesită utilizarea unor noi metode de diagnosticare și tratament. Să identifice microorganismele din biofilme compuse permit metode moleculare moderne - electroforeza pe gel și cromatografie lichidă de înaltă performanță cu hibridizare fluorescenta in situ, microscopie epiflyuorestsentnaya, microscopie electronică de baleiaj, confocal microscopie cu scanare cu laser (CLSM), revers transcriptaza PCR și alte studii [7].

Efectele terapeutice asupra biofilmelor pot fi direcționate către mecanismele aderenței inițiale a bacteriilor la suprafață, blocând sinteza sau distrugerea matricei polimerice, perturbând schimbul de informații intercelulari și pot fi, de asemenea, combinate cu agentul bactericid însuși. Un astfel de tratament, care acționează asupra structurii sau funcției biofilmelor, poate fi mai eficient decât terapia antibiotică standard [4]. Astfel, tratamentul infecțiilor cronice nu se mai poate baza pe conceptul tradițional de microbiologie. Noile idei despre biofilme necesită o schimbare în abordările diagnosticului și tratamentului infecțiilor în diferite domenii ale medicinei.

SV Maltsev, G.Sh. Mansurov

Kazan State Medical Academy

Maltsev Stanislav Viktorovich - Profesor, șef al Departamentului de Pediatrie cu curs de pediatrie policlinică

1. Watnick P., Kolter R., Biofilm, orașul microbilor. J Bacteriol 2000; 182: 2675-9.

2. Tets V.V. Comunități bacteriene. În: Comunitățile celulare / ed. V. Teza. St Petersburg: Editura Universității de Stat din Sankt Petersburg, 1998. - pag. 15-73.

3. Costerton J.W., Stewart P.S., Greenberg E.P. Biofilme bacteriene: o cauză comună a infecțiilor persistente. Science 1999; 284: 1318-22.

4. Costerton, W., Veeh R, Shirtliff, M și colab. Studiul științei biofilmelor. Clin. Invest 2003; 112: 1466-77.

5. O'Toolé G.A., Kaplan H.B., Kolter R. Formarea biofilmului ca dezvoltare microbiană. Ann Rev Microbiol 2000; 54: 49-79.

6. Tetz V.V. Efectul agenților antimicrobieni și al mutagenilor asupra celulelor bacteriene din colonii. Med Microbiol. Lett., 1996; 5: 426-36.

7. Tetz V.V. și colab. Fosfolipidele extracelulare ale comunităților bacteriene izolate. Biofilms, 2004; 1: 149-55.

8. Sponza D.T. Produse chimice pentru tot felul de flori organice în condiții de echilibru. Enzyme Microb Technol, 2003; 32: 375-85.

9. V.V. Tets, N.K. Artemenko. Biofilmele de agenți patogeni ai uroinfecțiunii și utilizarea fluorochinolonelor. Consilium Medicum. - Urologie, 2008. - T. 10. - № 4.

10. El-Azizi M. și colab. // Ann. Clin. Microbiol. Antimicrob. 2005. V. 4 P. 2.

11. Davies D. Înțelegerea rezistenței la biofilm la agenții antibacterieni. Nat Rev Drug Discov 2003; 2: 114-22.

12. Campanac C., Pineau L., Payard A., Baziard-Mouysset G., Roques C. Interacțiunile dintre agenții cationici ai biocidului și biofilmele bacteriene. Agenți antimicrobieni, Chemother 2002; 46: 1469-74.

13. Chambless J.D., Hunt S.M., Philip S.S. Un model computerizat tridimensional al mecanismelor ipotetice care protejează biofilmele de la antimicrobialele Appl. și Microbiologie de mediu, 2006; 72: 2005-13.

14. Harrison J.J., Ceri H., Roper N.J., Badry E.A. și colab. Celulele Persister mediază toleranța la oxianii metalici în Escherichia coli. Microbiologie. 2005; 151: 3181-95.

15. Shah K.D., Spoering A.N., Lewis K.K. Specializate celule persiste de Escherichia coli. J Bacteriol 2004; 186: 8172-80.

16. Sandoe J. și colab. Măsurarea activității ampicilinei, vancomicinei, linezolidului și gentamicinei împotriva biofilmelor enterococice, Journal of Chimoterapia Antimicrobiană, 2006; 57: 767-70.

17. Hancock V., Ferrières L., Klemm P. Formarea biofilmului prin tulpinile Escherichia coli infecțioase ale tractului urinar asimptomatic și virulent. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2007; 51: 212-9.

18. Tenke P., Kovacs B., Jackel M., Nagy E. Rolul infecției cu biofilm în urologie. Jurnalul Mondial de Urologie, 2006; 24: 13-20.

19. Trautner B.W., Darouiche R.O. Rolul biofilmului în infecția tractului urinar asociat cateterului. Jurnalul American de Control al Infectării 2004; 32: 177-83.

20. Ryder M.A. Infecții legate de cateter: este vorba despre biofilm. Subiecte în practica avansată Nursing eJournal. 2005; 5 (3).

21. Hunt S.M. și colab. Ipoteza rolului starii nutritive în detașarea biofilmului. Appl Environ Microbiol, 2004; 70: 7418-25.

22. Wolcott R.D., Ehrlich G.D. // JAMA. 2008. 299, p. 2682.

23. Ehrlich G.D. și colab. // Clin. Orthop. Reiat. Res. 2005. V. 437. P. 20.

24. Dowd S.E. și colab. // BMC Microbiol. 2008. V. 8. P. 43.

25. Genele care fac bacteriile sa-si faca mintea, ScienceDaily, 6 aprilie 2009.

26. Biofilms: descoperirea unui nou mecanism de propagare a virusului, ScienceDaily, 2010, Feb. 8.

27. Joan A. Geoghegan și colab. Rolul proteinei de suprafață SasG în formarea biofilmului de Staphylococcus aureus. Journal of Bacteriology, Nov., 2010, V. 192, nr. 21, p. 5663-5673.

28. Debra, W. Jackson și colab. Formarea biofilmului și dispersarea sub influența regulatorului global al Escherichia coli CsrA, Journal of Bacteriology, Jan., 2002, V. 184, No. 1, p. 290-301.